Исследование гетерогенности белков сыворотки крови методом зонального электрофореза

М ы Н ы С Т Е Р С Т В О О С В ы Т И У К Р А э Н И ЧЕРКАСЬКИЙ ДЕРЖАВНИЙ УНыВЕРСИТЕТ ьм. Б. ХМЕЛЬНИЦЬКОГО Кафедра органьчною та бьологьчною хьмью ДОСЛыДЖЕННЯ ГЕТЕРОГЕННОСТы БыЛКыВ СИРОВАТКИ КРОВы МЕТОДОМ ЗОНАЛЬНОГО ЕЛЕКТРОФОРЕЗУ ДИПЛОМНА РОБОТА студента 5 курсу природничого факультету Науковий керьвник доктор бьологьчних наук Ч Е Р К А С И 1996
З М ы С Т. . ВСТУП............................................. 3 . О Г Л Я Д Л ы Т Е Р А Т У Р И. 1.Загальна характеристика бьлкьв кровь............ 6 2.Характеристика бьлкових фракцьй сироваткикровь роздьлених зональним електрофорезом................ 9 3. Змьни бьлкьв кровь при патологью............... 21 . ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА ЧАСТИНА. 1. Матерьали та методи досльдження:............... 25 а) вьдпрацювання методики диск-електрофорезу в ПААГ....................................... 32 б) вьдпрацювання методу радьальною ьмунодифузью................................. 37 2. Результати досльдьв та юх обговорення: а) досльдження гетерогенность бьлкового спектрусироватки кровь в нормальних фьзьологьчних умовах........ 41 б) досльдження гетерогенность бьлкового спектрусироватки кровь при дью ьоньзуючого випромьнювання....... 45 в) досльдження вмсту ьмуноглобульньв сироваткикровь пьд впливом ьоньзуючого випромьнювання............. 51 . ВИСНОВКИ.......................................... 54 . ЛыТЕРАТУРА........................................ 55 . ДОДАТOК........................................... 58
А Н О Т А Ц ы Я. В даньй роботь досльджено вмьст та розподьл бьлковихфракцьй сироватки кровь в нормальних фьзьологьчних умовах тав умовах впливу на органьзм ьоньзуючого випромьнювання. В результать досльджень встановлено, що пьд впливомьоньзуючого випромьнювання спостерьгаються значнь змьнибьлкового спектру кровь внасльдок значного збьльшення гло-бульнових фракцьй ( -, -глобульньзацья) та зменшенняфракцьй альбумьну за рахунок пофракцьйного перерозподьлубьлкьв по типу електрофоретичною гомогеньзацью. Виявлено змьни кьлькьсного вмьсту та якьсного складуьмуноглобульньв сироватки кровь, якь можуть бути використаньу виглядь бьохьмьчних маркерьв при дьагностиць та прогнозу-ваннь перебьгу ряду захворювань. ВСТУП. В даний час особливо велика увага надашться розвитку тавдосконаленню досльджень, спрямованих на з'ясування тапьзнання закономьрностей ь механьзмьв бьохьмьчних, генетич-них, ьмунологьчних основ процесьв життшдьяльность, виясненнювзашмозв'язку мьж структурою важливих компонентьв живих ор-ганьзмьв та юх бьологьчними функцьями. Матерьальну основу всьх процесьв життшдьяльность живихорганьзмьв складають тисячь хьмьчних реакцьй, для яких ха-рактерними ознаками ш висока швидкьсть, певна часова тапросторова скоординованьсть ь взашмозалежньсть. При цьомусльд враховувати, що органьзм людини знаходиться в постьйно-му взашмозв'язку з зовньшньм середовищем ь, як правило, за-знаш закономьрного впливу рьзних факторьв,якь можуть виявля-ти рьзноплановий вплив на певнь сторони обмьну речовин таструктуру ь функцью чисельних компонентьв живих кльтин, вьдяких залежить життшдьяльньсть органьзму. Важливими структурними компонентами живих органьзмьв, зякими ь пов'язань всь прояви юх життшдьяльность, ш бьлки. Цьвисокомолекулярнь азотовмьснь бьопольмери вьдьграють важливуроль в живих органьзмах ь ш основою юх структури та основоюобмьну. З бьлками пов'язань такь процеси, як подразливьсть,скоротливьсть, здатньсть до самооновлення та самовьдтворен-ня, без яких важко уявити живь системи. Враховуючи важливуроль бьлкьв в органьзмь, а також той факт, що бьлки визнача-ють чисельнь важливь функцью живого органьзму та досить чут-ливь до рьзних змьн його стану, досльдження бьлкового спект-ру рьдин та тканин органьзму може складати значний ьнтерес.Це тим бьльше важливо, поскьльки вивчення бьлкового спектруможе допомогти в з'ясуваннь причин, якь сприяють виникненню
- 4 -рьзних захворювань ь, в першу чергу, порушення ьмунного ста-тусу органьзму, здатность його до адекватною реакцью навплив несприятливих факторьв хьмьчною, фьзичною чи бьологьч-ною природи. Незаперечним ш той факт, що вмьст загального бьлка табьлкових фракцьй в тканинах ь рьдинах органьзму (сироватцькровь, плазмь, лькворь) ш важливим дьагностичним показникомта показником резистентность органьзму. Це обумовлено тим,що вмьст загального бьлка ь бьлкових фракцьй зазнаш певнихзмьн пьд впливом ендо- та екзогенних факторьв та при за-хворюваннях внутрьшньх органьв та порушеннях обмьну речовин.При цьому спостерьгаються закономьрнь змьни вмьсту бьлкьвта юх фракцьй в рьдинах ь тканинах органьзму. Такими факторами може бути ьоньзуюче випромьнювання,рьзнь хьмьчнь сполуки, ьони метальв, якь потрапляють до ор-ганьзму ьз зовньшнього середовища, а також токсини мькроор-ганьзмьв, що викликають ьнфекцьйнь захворювання та порушеннядьяльность внутрьшньх органьв та систем органьзму. Досльдження та детальне вивчення механьзмьв впливурьзних ендо- та екзогенних факторьв на перебьг метабольчнихпроцесьв в органьзмь маш велике значення особливо в данийчас, поскьльки в результать техногенного та антропогенноговпливу значно погьршився стан довкьлля. За цих умов живь ор-ганьзми, в тому числь ь людина, постьйно знаходяться векстремальних умовах, що зумовлено рьзними чинниками. Це,в першу чергу, значне погьршення екологью пьд впливом техно-генного пресьнгу, аварью на ЧАЕС та ьн. Таким чином, органьзм людини знаходиться в постьйномудвосторонньому зв'язку з зовньшньм середовищем, яке можепроявляти значний вплив на його фьзьологьчнь функцью, обмьнта метабольчнь